Was ist Gel Dokumentation?
Geldokumentationsanlagen oder kurz Geldocs sind Geräte, mit deren Hilfe man 1D Elektrophoresegele aufnehmen kann. Vorrangig wird dazu die Technik der Gelelektrophorese genutzt. Gelelektrophorese ist eine analytische Methode der Chemie und Molekularbiologie, um verschiedene Arten von Molekülen in einem elektrischen Feld zu trennen. Dabei wandert eine Mischung aus zu trennenden Molekülen unter Einfluss eines elektrischen Felds durch ein Gel, welches in einer ionischen Pufferlösung liegt. Je nach Größe und Ladung der Moleküle bewegen sich diese unterschiedlich schnell durch das als Molekularsieb wirkende Gel. Dabei wandern kleine, negativ geladene Moleküle (Anionen) am schnellsten in Richtung der positiv geladenen Anode und positiv geladene Moleküle (Kationen) in Richtung der negativ geladenen Kathode.
Geldokumentationssysteme bestehen in den meisten Fällen aus einem Transilluminator, der das Gel mit einer UV Wellenlänge anregt oder es mit Weislicht bescheint.
Die UV Transilluminatoren oder auch kurz UV-Tische sind meist für den Einsatz in allen Bereichen der tägliche Routine konzipiert so z.B. zur Ausleuchtung von Proben für die anschließende quantitative Auswertung oder für die Präparation von Proteingelen.
Zum Einsatz kommen auch Blaulicht Transilluminatoren
Blaulicht-Transilluminator sind meist für die Farbstoffe AmphiRed sowie SYBR Farbstoffe konzipiert, die im blauen Bereich angeregt werden und oberhalb von 520 nm emittieren. Auch nach langen Belichtungszeiten sind keine signifikanten Schädigungen des Materials festzustellen.
Hier gilt zu beachten, dass UV-Strahlung die DNA bereits nach Sekunden zerstören kann und damit jegliche Folgereaktion verhindert bzw. Experimente verfälschen kann.
Der Transilluminator muss dabei in eine dunkle Box gestellt werden, um einen Lichteinfall von außen zu vermeiden. Diese dunkle Box (Darkroom, Dunkelhaube) ist meist aus Metallgehäuse aufgebaut, in das der Transilluminator eingestellt ist. Alternativ kann bei preisgünstigen Systemen die Dunkelbox auch als Haube ausgeführt werden, die über den Transilluminator gestellt wird.
Die Aufnahme des 1D Gels wird dann über eine meist CCD Kamera in der Dunkelhaube übernommen. Hier unterscheidet man PC gesteuerte oder Stand-Alone Systeme. Bei PC gesteuerten Systemen übernimmt eine Steuersoftware die Bildaufnahme und Speicherung. Diese Steuersoftware kann auch weiter Funktionen wie GLP Konformität bis zur Methodendefinition übernehmen. Bei Stand-Alone Systemen wird die Aufnahme meist über manuelle Bedienung oder eine integrierte Kamerasteuerung gewährleistet. Das aufgenommene Gel kann dann auf einen USB Stick gespeichert werden oder über einen angeschlossenen Drucker auf Photopapier gedruckt werden.